在微生物培养、细胞扩增及发酵实验中,透气/密封盖三角摇瓶的特殊瓶盖设计与密封盖既保障了培养环境的精准控制,也对清洗提出了更高要求。若清洗不当,残留培养基、蛋白或内毒素将导致交叉污染、滤膜堵塞甚至实验失败。掌握透气/密封盖三角摇瓶的科学清洗方法,是确保呼吸自由、密封可靠的前提。
一、使用后立即预处理,防止干结
实验结束后,切勿放置过夜。立即倒空内容物,用自来水初步冲洗内壁及瓶口,去除大部分残留。对于含高糖、高蛋白或琼脂的培养基,可先用温水(≤40℃)浸泡30分钟软化,避免高温导致蛋白变性粘附。
二、分类清洗:透气盖与密封盖区别对待
密封盖:拆下硅胶垫与塑料盖体,分别清洗。硅胶垫可用软毛刷蘸中性洗涤剂轻刷,避免尖锐物划伤;
透气盖:严禁超声或高压冲洗滤膜面!仅用去离子水从瓶内向外gentle冲洗(避免污染物压入滤膜孔隙),或用70%乙醇喷洒消毒后风干。切勿浸泡、刷洗或autoclave滤膜部分(除非标明耐受)。
三、深度清洁:去污与去热原并重
将摇瓶本体与可拆卸盖件放入实验室专用清洗机,使用碱性清洗剂程序清洗,水温60–70℃,时间≥20分钟。若手工清洗,用瓶刷配合中性酶洗液刷洗内壁、瓶颈螺纹及底部拐角,再用大量去离子水冲洗至pH中性。
四、灭菌前干燥与检查
清洗后倒置晾干于洁净晾干架,或60℃烘箱烘干。重点检查:
透气盖滤膜是否完整、无变色、无堵塞(透光观察);
瓶口螺纹无裂纹,密封圈无老化变形;
瓶身无划痕或应力白化(影响耐压性)。
五、灭菌方式选择
密封盖摇瓶:可整体121℃高压蒸汽灭菌20分钟;
透气盖摇瓶:仅瓶体可高压,滤膜盖建议采用环氧乙烷或伽马射线辐照灭菌;部分耐高温型号(明确标注)可短时高压,但需确认厂家说明。